PRÁCTICA 11: DETERMINACIÓN DEL TÍTULO ANTI-SLO

OBJETIVO:

El objetivo de está practica es la realización de una inhibición de la hemaglutinación para determinar el título de antiestreptolisina O.

PRINCIPIO:

El carácter inmunogénico de la SLO permite valorar la extensión de una infección estreptocócica, por simple titulación del nivel en suero de anticuerpos anti-SLO. Diluciones crecientes del suero problema se enfrentan con una cantidad constante de SLO, en presencia de una suspensión de hematíes, determinándose la dilución de suero más alta capaz de inhibir el poder hemofílico de la toxina. La inversa de dicha dilución corresponde al título del suero.

REACTIVOS:
- Tampón

- Suspensión de hematíes

- SLO

APARATAJE:
- Estufa de incubación

MATERIAL:
- Pipetas automáticas 50 uL/20-200uL
- Puntas amarillas
- Gradillas para Eppendorf

- Placa en forma de U

- Parafilm

MUESTRA:
- Suero 1/25

- Suero 1/10

PROCEDIMIENTO (MICROMÉTODO):
A) Diluciones del suero:
- Preparar las siguientes diluciones del suero del paciente:
0,2 ml suero+1,8 ml tampón (1:10)
0,1 ml suero+2,4 ml tampón (1:25)

A parir de aquí, proceder del siguiente modo:

RESULTADOS:
El título de antiestreptolisina O corresponde a la inversa de la mayor dilución en cuyo tubo no se detecta una hemólisis (velo).
- Hematíes debe aparecer libre de hemólisis (botón).

- Estreptolisina O debe presentar una hemólisis evidente.

- Fila A: El título sería 80.

- Fila B: El título sería 200.