PRÁCTICA 5: DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ANTI-ESTREPTOLISINA O (ASO)

PRINCIPIO DEL MÉTODO:

El ASO-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de anti-estreptolisina O (ASO) en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con estreptomicina O (SLO) son aglutinadas por anticuerpos ASO presentes en la muestra del paciente.

SIGNIFICADO CLÍNICO:

La estreptolisina O es un exoenzima inmunogénico tóxico producido por estreptococos ß-hemolíticos de los grupos A, C y G. La cuantificación de los anticuerpos ASO se utiliza para el diagnóstico y tratamiento de enfermedades como las fiebres reumáticas, glomerulonefritis aguda, y otras infecciones estreptocócicas . Las fiebres reumáticas es una enfermedad inflamatoria que afecta al tejido conectivo de diversas zonas del cuerpo humano (piel, corazón, articulaciones, etc...) y la glomerulonefritis aguda es una inflamación del riñón que afecta principalmente a los glomérulos renales.

REACTIVOS:

Látex Control + Tapón rojo Control - Tapón azul

Suspensión de partículas de látex cubiertas con SLO, pH, 8,2. Conservante. Suero humano, con una concentración de ASO > 200 UI/mL. Conservante. Suero animal. Conservante.

MATERIAL:

- Pipetas de 50 μL
- Puntas de pipeta 
- Vaso de desechos
- Tarjeta látex
- Pipeta Pasteur

MUESTRAS:

- Suero fresco

PROCEDIMIENTO:

1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas.

2. Depositar 50 μL de los controles Positivo y Negativo, sobre círculos distintos de la tarjeta y una gota de látex en ambos.

3. Colocar en D1: una gota de solución + el control positivo, y resuspender.

4. Colocar en D2, D3 y D4 una gota de solución salina.

5. Procedemos a coger 50 uL del D1 y colocar en D2, realizamos el mismo paso de D2 a D3 y de D3 a D4. (Cambiando las puntas de pipeta).

6. Colocar una gota de látex en todos los D1 a D4.

7. Agitamos durante 2 minutos con la mano.

8. Esperamos el resultado. Si hay o no aglutinación.

RESULTADOS:

Titulación 2.

Si multiplicamos 200 x Título de ASO, obtenemos como resultado una concentración aproximada de 400 UI/mL.

OBSERVACIONES:

- Se realizó un solo control positivo y negativo, por cada 5 personas.

- Atemperar los reactivos y muestras, para que no influya en el ensayo.

- Tener en cuenta que para mezclar, se deben usar distintos palillos.

- Si agitamos en exceso puede originar la aparición de falsos positivos.